Projets
Equipe Ascidian Biocell Group

Meïose et fécondation

Collaborations

Collaborations

G. Prulière, D. Burgess et M. Levasseur

Description

L’objectif de ce projet est de mieux comprendre comment le cycle cellulaire a été adapté pour répondre aux besoins spécifiques des ovocytes et d’établir comment sont régulés les clivages inégaux générant les globules polaires durant la méiose.

L’ovocyte ovulé est arrêté à une étape spécifique du cycle cellulaire et attend le spermatozoïde pour activer le développement embryonnaire. Les œufs d’ascidie sont arrêtés en métaphase de la méiose I et la fécondation déclenche l’achèvement de deux divisions méiotiques précédant la fusion des génomes parentaux et les clivages embryonnaires. Nous avons constaté que, dans les ascidies comme dans la plupart des autres métazoaires, la voie Mos / MAPK impose l’arrêt du cycle cellulaire dans les œufs ovulés (dit arrêt cytostatique induit par le « CSF »). En outre, c’est la cinétique d’inactivation de la voie Mos /MAPK après fécondation qui limite à deux le nombre de globules polaires durant la méiose de l’ascidie (Dumollard et al., 2011). L’activé Mos / MAPK favorise également un clivage très inégal (et donc la formation de petits globules polaires) en maintenant un petit fuseau méiotique périphérique (Dumollard et al., 2011; McDougall et al , 2011; Costache et al., 2014). Enfin, nous avons décrit les phosphatases qui s’opposent à l’activité MAPK dans l’œuf ascidie et permettent la libération de l’arrêt cytostatique et la sortie de la méiose comme étant PP2A et Calcineurine (Levasseur et al., 2013).

2PBs-extrusion phallusia2PBs-extrusion Phallusia (McDougall et al., 2020)

L’extrusion du premier globule polaire (PB1) se produit 9 minutes après la fécondation et l’extrusion du 2ème globule polaire (PB2) intervient environ 25 minutes après la fécondation. Une série d’étapes accompagne les clivages inégaux produisant les globules polaires. D’abord, le fuseau méiotique migre près du cortex d’une manière actine dépendante, définissant le pôle animal de l’œuf et provoquant la différenciation du cortex sus-jacent (Prodon et al., 2006; Prodon et al., 2008).

Après l’activation des œufs, la membrane plasmique recouvrant le fuseau méiotique produit une protrusion lors de la phase de « outpocketing » et le fuseau tourne et maintien un de ses pôles dans la protrusion. Le globule polaire est formé après anaphase par abscission en laissant un résidu de « midbody » dans l’ovocyte (McDougall et al., 2020). Nous avons constaté que l’abscission du globule polaire est régulée par Aurora kinase dans l’œuf d’ascidie (Hebras et McDougall, 2012).

 

2PBs-extrusion-Mytilus2PBs-extrusion Mytilus (McDougall et al., 2020)

Nous étudions maintenant les mécanismes responsables du positionnement du fuseau méiotique dans l’œuf et quels sont les générateurs des forces qui sous-tendent le clivage inégal entraînant l’extrusion d’un petit globule polaire.

Publications

  •  Prodon F, Chenevert J, Sardet C (2006) Establishment of animal–vegetal polarity during maturation in ascidian oocytes Developmental biology 290 (2), 297-311.
  •  Prodon F, Sardet C, Nishida H (2008) Cortical and cytoplasmic flows driven by actin microfilaments polarize the cortical ER-mRNA domain along the a–v axis in ascidian oocytes. Developmental biology 313 (2), 682-699.
  • Dumollard R, Levasseur M, Hebras C, Huitorel P, Carroll M, Chambon JP, McDougall A. (2011) Mos limits the number of meiotic divisions in urochordate eggs. Development. Mar;138(5):885-95.
  •  McDougall A, Chenevert J, Lee KW, Hebras C, Dumollard R. (2011) Cell cycle in ascidian eggs and embryos. Results Probl Cell Differ. ;53:153-69.
  •  McDougall, A., Chenevert, J. and Dumollard, R. (2012). Cell Cycle Control in Oocytes and during Embryonic Cleavage Cycles in Ascidians. Int Rev Cell Mol Biol. 297, 237-266.
  •  Hebras, C. and McDougall, A. (2012).  Urochordate ascidians possess a single isoform of Aurora kinase that localizes to the midbody via TPX2 in eggs and cleavage stage embryos.  PLOS One 7 (9), e45431.
  • Costache V, McDougall A, Dumollard R. (2014) Cell cycle arrest and activation of development in marine invertebrate deuterostomes. Biochem Biophys Res Commun. 450(3):1175-81. 
  • McDougall A, Hebras C, Pruliere G, Burgess D, Costache V, Dumollard R, Chenevert J. (2020) Role of PB1 Midbody Remnant Creating Tethered Polar Bodies during Meiosis II. Genes (Basel). ;11(12):1394. doi: 10.3390/genes11121394. PMID: 33255457; PMCID: PMC7760350.

Protocoles

Collecte des gamètes
Ascidies
Activation du sperme
Ascidies
préparation des œufs déchorionnés
Ascidies
fécondation et culture des embryons
Ascidies
transgénèse par microinjection des œufs
Ascidies

Personnels Enseignants

Photo annuaire
Carine Barreau
Chercheur | SORBONNE UNIVERSITE
carine.barreau[at]imev-mer.fr
+33 (0) 4 93 76 39 73
Bâtiment Jean-Maetz
Photo annuaire
Joao Carvalho
Chercheur | SU
joao.carvalho[at]imev-mer.fr
+33 (0) 4 93 76 37 89
Station Zoologique

Master Biologie Moléculaire et Cellulaire

Parcours Biologie Cellulaire et du Développement & Cellules Souches

DEVELOPPEMENT DES ORGANISMES MARINS (DOMO)

Cette UE se déroule sur 2 semaines et a lieu au laboratoire de Biologie du Développement de Villefranche -sur-Mer (LBDV). Elle inclut l’examen de l’UE d’analyse scientifique (5V089) suivie par les étudiants de la spécialité de Biologie du Développement.

Durant la 1ère semaine, les étudiants participent à des ateliers et des rencontres avec les chercheurs du laboratoire.

Durant la 2ème semaine, les étudiants sont répartis dans les équipes pour y réaliser un mini projet qu’ils présentent le dernier jour du cours. Le cours est donné en anglais pour tout ou partie.

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Modalités  d’évaluation

Présentation orale du mini-projet (binôme, 100 %)  

UE en anglais (partiellement ou totalement)

Master BMC, S3, 6 ECTS

Code UE: 5V200

Responsable de l’UE: Carine BARREAU (MCU): carine.barreau [at] obs-vlfr.fr

Master Biologie Intégrative & Physiologie

Parcours Biologie et Bioressources Marines (BBMA)

ORGANISMES MARINS & MODELES BIOLOGIQUES

Cette UE permet aux étudiants de 1ère année de Master de passer 2 semaines à l’Observatoire Océanologique de Villefranche-sur-Mer. Le cours est obligatoire pour les étudiants du Master Biologie Intégrative, parcours Biologie et Bioressources Marines (BBMA) tandis qu’il peut être choisi en option par les étudiants du Master Biologie Moléculaire et Cellulaire (BMC). Les étudiants participent à des ateliers de présentation des organismes marins utilisés par les équipes de recherche du laboratoire (LBDV) et apprennent à les manipuler au cours de travaux pratiques dont les thématiques vont de la Biologie du Développement fondamentale à la toxicologie appliquée.

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Modalités  d’évaluation

Analyse d’article et présentation orale (50%)

Compte-rendu écrit de TP (50%)  

UE partiellement en anglais

Master BIP, S2, 6 ECTS

Code UE: 4B022 (ouverte au Master BMC)

Responsable de l’UE: Carine BARREAU (MCU): carine.barreau [at] obs-vlfr.fr

Licence de Sciences de la Vie

Parcours Biologie et Bioressources marines

Biologie Des Organismes Marins Et Diversité Des Recherches

Cette UE complémentaire se déroule sur 2 semaines et permet aux étudiants de découvrir les différents aspects (métiers & recherche) de l’Observatoire Océanologique de Villefranche-sur-Mer (OOV). Ateliers et journal clubs sont organisés afin que les étudiants mettent en pratique leurs connaissances théoriques en biologie et développent leur capacité de communication scientifique en français et en anglais.

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