Projets
Equipe Ascidian Biocell Group

Morphologie de l'embryon

Collaborations

Collaborations

CP Heisenberg, D. Burgess, M Veeman, H Turlier.

Description

Nous utilisons les avantages de l’embryogenèse précoce d’ascidie pour étudier le contrôle de 1) le nombre de cellules, 2) la taille des cellules et 3) le positionnement des cellules dans l’embryon et comment ces trois mécanismes cellulaires sont utilisés pour générer la forme de l’embryon de stade blastula. Alors que la dépendance temporelle de la division cellulaire définira le nombre de cellules, les aspects spatiaux de la division cellulaire (taille et position) reposent sur une biomécanique cellulaire complexe et des mécanismes intracellulaires positionnant le fuseau mitotique. Nous avons découvert récemment que le moment de la division cellulaire informe la position des cellules via des changements dépendants du cycle cellulaire de la tension cellulaire et de l’adhésion cellulaire.
  • Nombres de cellules
Nous avons constaté que le nombre de cellules est contrôlé avec précision de telle sorte que tous les embryons d’ascidies présentent un stade de 24 cellules. Cette asynchronie est maintenue (au stade 44 cellules) et amplifiée donnant lieu à une gastrula à 112 cellules. Nous avons montré chez les ascidies que le remodelage du cycle cellulaire dépend d’un réseau de régulation génique contrôlé par la b-caténine (McDougall et al, 2012 ; Dumollard et al., 2013).

Dumollard et al., 2013

  • Taille des cellules
Nous avons étudié comment la division cellulaire inégale (UCD) est contrôlée dans l’embryon d’ascidie. Nous avions précédemment montré que l’UCD dans les embryons de Phallusia se produisait en raison de l’attraction d’un pôle du fuseau vers une structure corticale appelée CAB (pour centrosome-attracting body) pendant la prométaphase jusqu’à l’anaphase (Prodon et al., 2010, McDougall et al., 2015 ). Nous avons ensuite constaté que la dépolymérase des microtubules appelée Kif2 est localisée au CAB et est impliquée dans la réduction de la taille de l’aster proximal facilitant ainsi la traction du pôle du fuseau vers le CAB (Costache et al., 2017). En termes de mise en forme de l’embryon entier, l’ablation CAB radialise complètement l’embryon, indiquant que l’UCD affecte la forme de tous les blastomères dans l’embryon précoce.

Costache et al. 2017

Dumollard et al., 2017

  • Positionnement des cellules
Récemment, nous avons découvert qu’un mécanisme de détection de la forme apicale fonctionne pour aligner tous les fuseaux parallèlement à la surface extérieure (apicale) de l’embryon, en les orientant dans l’axe le plus long de chaque cellule dans le plan apical (à l’exception des fuseaux orientés par le CAB) (Dumollard et al., 2017). De plus, la relaxation de la tension corticale apicale pendant la mitose permet une division cellulaire orientée selon la tension, reflétant l’importance des tensions/forces à l’échelle de l’embryon dans l’embryon ascidien (Godard et al 2020). Curieusement, les divisions cellulaires axées sur la tension dépendent de l’asynchronie du cycle cellulaire qui crée une tension corticale différentielle entre des cellules interphasiques rigides de des cellules mitotiques molles et (Godard et al., 2020) Une telle asynchronie du cycle cellulaire conservée fournit une explication biologique cellulaire partielle du modèle de clivage invariant des embryons d’ascidies qui a été élégamment décrit par Conklin il y a plus d’un siècle (Conklin, 1905).

Position des cellules

16-32 cell spindle rotation

Publications

  • Conklin E.G., (1905) The organization and cell-lineage of the Ascidian Egg. Journal of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia 3 (1).
  • Costache, V., Hebras, C., Pruliere, G. et al. (2017) Kif2 localizes to a subdomain of cortical endoplasmic reticulum that drives asymmetric spindle position. Nat Commun 8, 917. https://doi.org/10.1038/s41467-017-01048-8
  • Dumollard R, Hebras C, Besnardeau L, McDougall A. (2013) Beta-catenin patterns the cell cycle during maternal-to-zygotic transition in urochordate embryos. Dev Biol.;384(2):331-42.
  • Dumollard R, Minc N, Salez G, Ben Aicha S, Bekkouche F, Hebras C, Besnardeau L, McDougall A. (2017) The invariant cleavage pattern displayed by ascidian embryos depends on spindle positioning along the cell’s longest axis in the apical plane and relies on asynchronous cell divisions. Elife. Jan 25;6. pii: e19290.
  • Prodon F, Chenevert J, Hébras C, Dumollard R, Faure E, Gonzalez-Garcia J, Nishida H, Sardet C, McDougall A. (2010) Dual mechanism controls asymmetric spindle position in ascidian germ cell precursors. Development. Jun;137(12):2011-21.
  • McDougall, A., Chenevert, J. and Dumollard, R. (2012). Cell Cycle Control in Oocytes and during Embryonic Cleavage Cycles in Ascidians. Int Rev Cell Mol Biol. 297, 237-266.
  • McDougall A, Chenevert J, Pruliere G, Costache V, Hebras C, Salez G, Dumollard R (2015) Centrosomes and spindles in ascidian embryos and eggs. Methods in Cell Biology, Volume 129, 317-39.
  • Godard B., Dumollard R., Munro E., Chenevert J., Hebras C., McDougall A., Heisenberg C.P.,(2020) Apical Relaxation during Mitotic Rounding Promotes Tension-Oriented Cell Division. Developmental Cell. 55(6):695-706.e4. doi: 10.1016/j.devcel.2020.10.016.
  • Godard BG., Dumollard R., Heisenberg CP., McDougall A., (2021) Combined effect of cell geometry and polarity domains determines the orientation of unequal division. Elife Dec 10;10:e75639. doi: 10.7554/eLife.75639

Protocoles

Marquage
Embryons

Protocole de marquage des membranes et des pôles des fuseaux métaphasique dans les embryons d’Ascidies

Segmentation manuelle d'image multidimensionnelle
Imaris

Cette segmentation permet d’obtenir à partir d’image multidimensionnelle des objets 3D.

Extraction surface apicale
Imaris

Extraction de la surface apicale d’une cellule préalablement modélisée 3D.

Détermination de l'axe long des blastomères selon le modèle mathématique de Minc
Matlab

Le scripte compare alors l’orientation du fuseau mitotique prédit avec l’orientation du fuseau mitotique observé (« Orienting déviation »). Il permet également de comparer la position du fuseau mitotique prédit avec la position du fuseau mitotique observé (« Centering déviation »).

Financements

Personnels Enseignants

Photo annuaire
Carine Barreau
Chercheur | SORBONNE UNIVERSITE
carine.barreau[at]imev-mer.fr
+33 (0) 4 93 76 39 73
Bâtiment Jean-Maetz
Photo annuaire
Joao Carvalho
Chercheur | SU
joao.carvalho[at]imev-mer.fr
+33 (0) 4 93 76 37 89
Station Zoologique

Master Biologie Moléculaire et Cellulaire

Parcours Biologie Cellulaire et du Développement & Cellules Souches

DEVELOPPEMENT DES ORGANISMES MARINS (DOMO)

Cette UE se déroule sur 2 semaines et a lieu au laboratoire de Biologie du Développement de Villefranche -sur-Mer (LBDV). Elle inclut l’examen de l’UE d’analyse scientifique (5V089) suivie par les étudiants de la spécialité de Biologie du Développement.

Durant la 1ère semaine, les étudiants participent à des ateliers et des rencontres avec les chercheurs du laboratoire.

Durant la 2ème semaine, les étudiants sont répartis dans les équipes pour y réaliser un mini projet qu’ils présentent le dernier jour du cours. Le cours est donné en anglais pour tout ou partie.

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Modalités  d’évaluation

Présentation orale du mini-projet (binôme, 100 %)  

UE en anglais (partiellement ou totalement)

Master BMC, S3, 6 ECTS

Code UE: 5V200

Responsable de l’UE: Carine BARREAU (MCU): carine.barreau [at] obs-vlfr.fr

Master Biologie Intégrative & Physiologie

Parcours Biologie et Bioressources Marines (BBMA)

ORGANISMES MARINS & MODELES BIOLOGIQUES

Cette UE permet aux étudiants de 1ère année de Master de passer 2 semaines à l’Observatoire Océanologique de Villefranche-sur-Mer. Le cours est obligatoire pour les étudiants du Master Biologie Intégrative, parcours Biologie et Bioressources Marines (BBMA) tandis qu’il peut être choisi en option par les étudiants du Master Biologie Moléculaire et Cellulaire (BMC). Les étudiants participent à des ateliers de présentation des organismes marins utilisés par les équipes de recherche du laboratoire (LBDV) et apprennent à les manipuler au cours de travaux pratiques dont les thématiques vont de la Biologie du Développement fondamentale à la toxicologie appliquée.

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Modalités  d’évaluation

Analyse d’article et présentation orale (50%)

Compte-rendu écrit de TP (50%)  

UE partiellement en anglais

Master BIP, S2, 6 ECTS

Code UE: 4B022 (ouverte au Master BMC)

Responsable de l’UE: Carine BARREAU (MCU): carine.barreau [at] obs-vlfr.fr

Licence de Sciences de la Vie

Parcours Biologie et Bioressources marines

Biologie Des Organismes Marins Et Diversité Des Recherches

Cette UE complémentaire se déroule sur 2 semaines et permet aux étudiants de découvrir les différents aspects (métiers & recherche) de l’Observatoire Océanologique de Villefranche-sur-Mer (OOV). Ateliers et journal clubs sont organisés afin que les étudiants mettent en pratique leurs connaissances théoriques en biologie et développent leur capacité de communication scientifique en français et en anglais.

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